开发一种间接的ELISA检测Toxoplasma gondii IgG抗体,基于重组TgIMP1蛋白质检测

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 寄生虫学的寄生虫学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 毒淋巴菌 (T. gondii) 是一种全球普遍存在的寄生虫,引起严重的健康问题,特别是在免疫受损的个体中.
• 现有的T. gondii感染和疫苗有效性评估的商业诊断套件存在局限性.
• 对于高性能酶链接免疫吸收试验 (ELISA) 对于精确的T. gondii检测有着极大的需求.

研究的目的:

• 开发和优化使用重组TgIMP1蛋白质进行间接ELISA (IMP1-iELISA),以改善T. gondii的检测.
• 评估新开发的IMP1-iELISA的诊断性能,包括灵敏度,特异性和可重复性.

主要方法:

• 重组TgIMP1蛋白在大肠杆菌BL () 细胞中的表达和净化.
• 使用纯化的TgIMP1.1,开发一种间接的ELISA (IMP1-iELISA).
• 优化反应条件和确定切断值 (0.2833) 使用T. gondii阴性血清.
• 评估测定可重复性,与其他病原体的交叉反应性和使用150个血清样本的诊断准确性.

主要成果:

• 在IMP1-iELISA中,在运行内和运行间的测试中,变化系数低于10%的高可重复性被证明.
• 该试验没有显示与感染了细胞巨乳病毒,疹病毒,红疹病毒,Cryptosporidium spp.,Theileria spp.,Neospora spp.和Plasmodium spp.的个体血清的交叉反应.
• IMP1-iELISA 实现了优异的诊断性能,灵敏度为 98.9%,特异性为 96.7%.

结论:

• 开发的基于TgIMP1的间接ELISA (IMP1-iELISA) 是一种特定,敏感和可重复的方法来检测T. gondii感染.
• 这种新型检测方法比现有的商业套件有了显著的改进,并有望在T. gondii诊断中获得医疗和公共卫生应用.