抗体的高位表达使用线性表达盒用于早期功能查
Shuang Wu1, Joni Tsukuda2, Nancy Chiang1
1Department of Antibody Engineering, Genentech, Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, United States.
Protein engineering, design & selection : PEDS
|August 14, 2024
概括
这项研究引入了一种快速,高产量的重组抗体表达系统,使用吉布森组装的线性DNA片段 (GLF). 这种新的方法显著提高了抗体产量,加速了抗体的发现并降低了成本.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 抗体的发现对于治疗和诊断至关重要.
- 目前的方法在产量和速度方面面临限制.
- 不同的抗体来源 (体内,体外,体内) 需要高效的表达系统.
研究的目的:
- 开发一个快速,高产率的系统,用于重组抗体表达.
- 为了提高发现工作流程的抗体净化效率.
- 为了降低抗体开发的成本和周转时间.
主要方法:
- 使用吉布森组合来创建线性DNA片段 (GLF).
- 在GLF上集成了新的保护侧翼序列.
- 开发了一个可扩展的表达和净化协议 (1毫升至30毫升).
- 采用蛋白A和尺寸排除染色法用于净化.
主要成果:
- 与以前的方法相比,实现了比以前的方法高5-10倍的纯化重组抗体产量.
- 证明了高质量的抗体生产,适应小规模和大规模.
- 获得了与基于等离子体的表达系统几乎相当的产量.
- 验证了抗体结合和活性评估系统.
结论:
- 基于GLF的系统在重组抗体表达方面取得了重大进展.
- 这种方法提高了效率,降低了成本,并加速了抗体的发现.
- 该系统适用于抗体研究中的各种规模和应用.


