folA thyA淘汰E. coli作为一个合适的替代模型来评估抗叶酸敏感性对PfDHFR-TSTS
Nattida Suwanakitti1, Yuwadee Talawanich1, Jarunee Vanichtanankul1
1National Center for Genetic Engineering and Biotechnology, National Science and Technology Development Agency, Thailand Science Park, Pathumthani, Thailand.
Acta tropica
|August 14, 2024
概括
一种新的细菌模型克服了针对疟疾的抗叶酸药物测试的局限性. 这种改进的系统准确地选抗疟疾化合物,并调查影响Plasmodium falciparum二酸盐减少酶的耐药性机制.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 寄生虫学的寄生虫学
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 以前的抗叶酸药物测试模型依赖于宿主酶的化学抑制,导致复杂的解释.
- 在早期模型中,不完全的抑制和抗生素干扰使抗叶酸耐药性的研究复杂化.
研究的目的:
- 开发一种卓越的细菌补充模型,用于针对疟疾寄生虫的抗叶酸药物查.
- 为了研究Plasmodium falciparum二叶酸减少酶 (PfDHFR) 酶中的抗叶酸耐药机制.
主要方法:
- 基因改造的大肠杆菌 (EcΔFΔT) 是通过敲除folA和thyA基因来创建的,使它们成为提米丁辅助性菌.
- 这些细胞补充了异构的Plasmodium falciparum (Pf) DHFR-TS基因.
- 使用这些细菌代用物,并与标准体外试验试验进行比较,评估了像pyrimethamine (PYR) 这样的抗叶酸化合物的疗效.
主要成果:
- EcΔFΔT模型显示了50%抑制度 (IC50) 值和标准体外抗疟疾试验之间的强烈相关性.
- 与之前的模型不同,三甲 (TMP) 对PYR易感性表现出不同的影响,取决于表达的PfDHFR-TS变体.
- 在表达低水平PfDHFR-TS.TS的化学淘汰细菌中观察到抗叶酸过敏.
结论:
- EcΔFΔT细菌替代体系统是选抗叶酸抗疟药物的宝贵工具.
- 这种模型为研究疟疾寄生虫抗叶酸抗性背后的机制提供了潜力.
