一个高度敏感的报告系统,用于监测内源YAP1/TAZ活动及其在各种人体细胞中的应用

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 分子生物学分子生物学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 是的相关蛋白1 (YAP1) 和具有PDZ结合动机 (TAZ) 的转录共激活剂在组织再生和癌症中起着双重作用. 对YAP1/TAZ活动的放松管制与这些过程有关,但上游监管机构仍然不清楚.
• 了解YAP1/TAZ的调节对于维持组织平衡和开发涉及异常信号的疾病的治疗策略至关重要.

研究的目的:

• 开发一种灵敏的报告系统,用于监测内源YAP1/TAZ活性在体外和体内.
• 通过化学图书馆选,识别YAP1/TAZ信号通路的新型调节剂.
• 为了证明该系统对其他信号通路的多功能性,如Wnt/β-catenin和NF-κB.

主要方法:

• 开发一个YAP1/TAZ/TEAD响应元件 (YRE) 集成到基于lentivirus的报告系统中.
• 利用光酶活性用于体外和金星光用于体内监测YAP1/TAZ活性.
• 使用记者细胞选364种化学抑制剂的库,以识别YAP1/TAZ和β-catenin信号传导的调节器.

主要成果:

• 报告系统成功监测了内源YAP1/TAZ活性,并且可以适应其他通路 (Wnt/β-catenin,NF-κB).
• 查发现了YAP1/TAZ和β-catenin信号传递的已知和新型抑制剂.
• 新型YAP1/TAZ调节剂,包括离子体和激酶抑制剂,已被证实会影响YAP1/TAZ蛋白水平,酸化和基因表达.

结论:

• 开发的报告员系统是一个强大的工具,用于对内源信号活动 (包括YAP1/TAZ) 的敏感实时监控.
• 该系统有助于在不同细胞环境中发现各种信号通路的新型调节器.
• 这些发现为YAP1/TAZ的调控提供了新的见解,并为再生医学和瘤学提供了潜在的治疗目标.