使用流量细胞计的多重高吞吐量查试验可以识别血流中的Trypanosoma brucei形式的糖溶性分子探针

科学领域:

• 寄生虫学的寄生虫学
• 生物化学 生化学
• 药物发现 药物发现 药物发现

背景情况:

• 像Trypanosoma brucei这样的kinetoplastid寄生虫会引起重大疾病,但它们的新陈代谢仍然不太清楚.
• 针对性化学探测器对于研究基内托塑代谢和确定新的治疗策略至关重要.

研究的目的:

• 开发一种高通量选试验,用于识别针对kinetoplastid寄生虫的化学探针.
• 为了能够同时测量活寄生虫中的多种糖解相关代谢物.

主要方法:

• 在T. brucei.中开发了一种使用基因编码的葡萄糖,ATP和糖体pH的生物传感器进行流动细胞计测试.
• 多重复合生物传感器 (pH与葡萄糖或ATP) 并使用 thiazole red. 测量细胞活力.
• 使用聚合的传感器细胞系选了一个14976个分子的化合物库.

主要成果:

• 该试验显示了可接受的Z'-因子值,用于高通量查,即使多重复合.
• 试点查结果的命中率为0.20.4%,许多化合物会影响多个代谢传感器.
• 重新查证实了在64%的测试中重复的活性,其中一种化合物显示出低微分子功效.

结论:

• 开发的多重生物传感器检测方法对于高通量查类昆虫寄生虫是有效的.
• 这种方法有助于发现新的化学探针来研究寄生虫的新陈代谢.
• 这些发现将推动对kinetoplastid生物化学的研究,并支持开发新的抗寄生虫药物.