开发和验证一种PMA-qPCR方法,用于准确量化益生菌中可活的乳糖菌
Lizheng Guo1, Xiaolei Ze2, Yingxin Jiao1
1China Center of Industrial Culture Collection, China National Research Institute of Food and Fermentation Industries Co., LTD., Beijing, China.
Frontiers in microbiology
|August 22, 2024
概括
一种新的基单化物-定量聚合酶连锁反应 (PMA-qPCR) 方法准确地量化了益生菌产品中可行的Lacticaseibacillus paracasei. 这通过精确测量活细菌数量来确保益生菌质量和消费者安全.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 分子生物学分子生物学
- 食品科学 食品科学 食品科学
背景情况:
- 益生菌的有效性取决于可行的细菌量化.
- 精确列举益生菌菌株,如Lacticaseibacillus paracasei对于产品质量至关重要.
- 现有的方法可能无法可靠地区分活跃细胞和非活跃细胞.
研究的目的:
- 开发和验证一种精确的一氧化与定量聚合酶连锁反应 (PMA-qPCR) 结合的方法.
- 为了准确量化各种益生菌配方中可行的Lacticaseibacillus paracasei.
- 确保可靠的益生菌产品质量保证和消费者安全.
主要方法:
- 基于全基因组序列设计和验证的L. paracasei的特定物种原料.
- 优化一氧化 (PMA) 治疗以抑制死细胞DNA放大.
- 使用纯培养和益生菌产品验证了PMA-qPCR方法,评估了线性,效率,准确性和偏差.
主要成果:
- PMA-qPCR方法在广泛的细胞范围 (103108 CFU/mL) 中显示出强烈的线性关系 (R2 = 0.994).
- 实现了高放大效率 (104.48%) 和低量化极限 (7.30 × 103 CFU/mL).
- 通过布兰德-阿尔特曼分析显示出极好的准确性 (偏差在±0.5 Log10) 和最小的平均偏差 (0.058 Log10).
结论:
- 经过验证的PMA-qPCR方法在各种益生菌基质中准确量化了可行的L. paracasei.
- 这种方法增强了益生菌产品的质量控制,确保监管合规和消费者信任.
- 提供了一个强大的工具,可靠地列出食品成分和成品中的可活益生菌.
