基于纸质的核酸量化分析装置,结合了CRISPR/Cas12a和个人血糖计
Yohei Tanifuji1, Guodong Tong1, Yuki Hiruta1
1Department of Applied Chemistry, Faculty of Science and Technology, Keio University, 3-14-1 Hiyoshi, Kohoku-ku, Yokohama 223-8522, Japan. citterio@applc.keio.ac.jp.
The Analyst
|August 22, 2024
概括
这项研究介绍了一种基于CRISPR的新型测定在纸质分析设备 (PADs) 上,用于简单的,点的护理人类乳头瘤病毒 (HPV) DNA检测. 综合系统使用个人血糖计来轻松量化,提供稳定和可访问的诊断工具.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子诊断学 分子诊断学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 基于CRISPR的核酸检测为临床检测提供了简单性,但在纸质分析设备 (PAD) 中未得到充分利用.
- PADs是简化复杂生物分析的有吸引力的平台.
- 将CRISPR与PAD集成可以提高诊断的可访问性.
研究的目的:
- 开发和演示一个集成到PAD的CRISPR辅助核酸量化方法.
- 为了实现信号读取,使用个人血糖计 (PGM) 进行简化量化.
- 评估人类乳头瘤病毒 (HPV) DNA检测集成装置的性能和稳定性.
主要方法:
- 在PAD中集成的CRISPR-Cas系统使用过纸保留磁珠.
- 通过冷干燥与三糖进行稳定的试剂的预沉积,以提高稳定性和易用性.
- 通过PGM读数对HPVDNA进行间接量化,最大限度地减少用户干预和复杂的试剂处理.
主要成果:
- 达到HPV DNA的57 pM的计算检测极限,与其他无放大CRISPR试验可比.
- 证明了CRISPR检测和PGM读取在PAD上的成功集成.
- 完全集成的设备显示出高达4周的良好存储稳定性.
结论:
- 开发的CRISPR辅助PAD为核酸量化提供了一种简化方法.
- 该设备的稳定性和PGM读数表明,实际的护理点核酸测试具有很大的潜力.
- 这项技术有助于将CRISPR诊断集成到用户友好的纸质平台中.
