使用广泛至敏感数据分析管道量化活细胞中的LC3BFRET生物传感器活动的协议

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 分子生物学分子生物学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 自是一种基本的细胞过程,涉及到细胞组件的降解和回收.
• 量化自开始对于理解细胞平衡和疾病发病至关重要.
• 评估自开始的现有方法可能很复杂或缺乏精度.

研究的目的:

• 为量化自开始提出一个全面的协议.
• 为此目的,利用微管相关蛋白1光链3β (LC3B) 福斯特的共振能量转移 (FRET) 生物传感器.
• 提供适用于FRET/FLIM成像的强大的图像分析管道.

主要方法:

• 细胞播种和转染的详细协议.
• FRET/FLIM (光终身成像显微镜) 的成像技术.
• 图像分析管道用于FRET传感器数据.

主要成果:

• 成功实施了一项量化自启动的协议.
• 证明LC3BFRET生物传感器在评估自状态中的实用性.
• 为FRET/FLIM数据开发一个可适应的图像分析管道.

结论:

• 本方案提供了一种可靠的方法来量化自开始.
• 这种方法是多功能和适用于各种生理和疾病的背景.
• 分析管道可以扩展到其他遗传编码的FRET传感器.