从转录因子ZNF711的以前退化的第七指域通过实验性NMR结构恢复了ZNF711的恢复

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 结构生物学 结构生物学
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 核转录因子ZNF711的Z7域包含一个氨酸,而不是23位的典型氨酸.
• 这种H23F替代导致了假设Z7域是非功能性的.

研究的目的:

• 为了研究Z7域的金属结合能力和功能,尽管H23F替代.
• 探索H26在Z7域内的金属协调中的潜在作用.

主要方法:

• 核磁共振 (NMR) 光谱法以确定Zn2+结合的Z7域的结构.
• 局部定向的突变发生产生H26A和F23H变体.
• pH值定位实验,以评估金属结合部位的参与.
• 酶动力学用于评估催化活性.
• 热稳定性测试. 热稳定性测试.

主要成果:

• 野生类型的Z7域采用稳定的ββ折叠,并具有三角形金属结合部位 (C3,C6,H19),其中H26不参与金属结合.
• 一个F23H突变恢复了一个四牙金属结合部位.
• 突变增加了域动态,但保持了高热稳定性 (>80°C) 并对金属离子结合亲和力产生轻微影响.
• 野生型Z7域在化4-尼托烯酸乙酸中表现出催化活性.

结论:

• 尽管有H23F的替代,ZNF711的Z7域是功能性的,具有三酸金属结合部位.
• 自然存在的三酸指对理解癌症突变有意义.
• 这些发现为药物向之前被认为是无法治疗的转录因子提供了潜在的途径.