通过HSQC识别和通过qHNMR量化创新制药氨基酸分析

科学领域:

• 分析化学 分析化学
• 频谱学是一种光谱学.
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 氨基酸的准确识别和量化对于制药和参考材料的应用至关重要.
• 传统的氨基酸分析方法可能很复杂,难以严格记录.
• 核磁共振 (NMR) 光谱为分子表征提供了一个强大的工具.

研究的目的:

• 开发和验证一种基于NMR的新方法,用于氨基酸的识别 (ID) 和量化 (纯度,强度).
• 评估高场 (600 MHz) 和基板 (60 MHz) NMR仪器对于这些测试的适用性.
• 建立一种可靠的方法来表征氨基酸参考材料.

主要方法:

• 质子核磁共振 (1H NMR) 光谱法用于初始分析,使用小量样本 (10 mg) 和马列酸作为内部校准剂.
• 碳-13核磁共振 (13C NMR) 通过多重编辑的异核单量子连贯性 (ed-HSQC) 用于化合物特定的识别.
• 质子定量核磁共振 (1H qNMR) 用于在高和低场强度下进行纯度和强度的确定.

主要成果:

• 1H NMR峰值模式,包括对比子存在,在不同的磁场强度中是一致的,表明场独立的光谱参数.
• 13C NMR ed-HSQC为可靠的氨基酸识别提供了化合物特定的光谱图案,对于13C化学转移具有很好的一致性 (<0.1 ppm偏差).
• 定量1H qNMR测定表明,分析的氨基酸参考材料候选物一般具有高纯度,使用增加样本量 (100 mg) 达到低不确定性.

结论:

• 开发的NMR方法对于氨基酸的识别和量化都有效,适用于参考材料的表征.
• 可以使用高场和基板NMR仪器,在分析能力方面提供灵活性.
• 13C NMR ed-HSQC方法为氨基酸识别提供了可靠和可记录的方法,补充了定量1H qNMR测定.