缓解高温LC-MS中列内人工修改,用于自下而上的蛋白质学和蛋白质生物制药的质量控制
Mykyta R Starovoit1, Siddharth Jadeja1, Taťána Gazárková1
1Department of Analytical Chemistry, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové, Charles University, Heyrovského 1203/8, 500 03 Hradec Králové, Czech Republic.
Analytical chemistry
|August 28, 2024
概括
高柱体温度可以改善分离,但会导致修饰. 这种新的LC-MS方法使用陷柱来减少工件,提高的识别和生物制药质量控制.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 生物化学 生物化学
- 质谱测量质量谱测量
背景情况:
- 升高柱体温度会增强的色谱分离.
- 高温可以导致人工的修改,损害分析质量.
研究的目的:
- 提出一种新的高温LC-MS方法,最大限度地减少的修饰和降解.
- 改进LC-MS分析中的分离和鉴定.
主要方法:
- 在加热分离柱上游的近环境温度下使用短直线陷柱.
- 优化陷柱的保持度和尺寸,以减少在加热柱中的停留时间.
- 将该方法应用于特斯图祖马布的图和探索性LC-MS蛋白质组分析.
主要成果:
- 在一个110分钟的Trastuzumab的图绘制中,峰值容量增加了1.4倍.
- 与30°C相比,在蛋白质组分析中获得了10%更多的标识.
- 与60°C的直接注射相比,与温度相关的工件 (N终端pyroGlu,氧化Met) 分别减少了66%和63%,比60°C的直接注射更低.
结论:
- 这种新方法保留了高柱体温度的好处,同时显著减少了基修饰.
- 这种方法提高了分析和生物制药品质量控制的可靠性.
- 提供了一种有价值的工具,用于改进LC-MS在研究和工业中的方法.


