构建含有老鼠变量和人类常量区域序列的基因

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 单克隆抗体为诊断和治疗人类瘤提供了特异性.
• 鼠标抗体面临由于反复给予异质抗体的免疫反应而发生的中和.
• 化学性免疫球蛋白结合了小鼠的可变区域和人类的常量区域,可以减轻这些免疫反应.

研究的目的:

• 通过将老鼠和人类遗传元素结合起来,构建一个基马体免疫球蛋白基因.
• 为了证明在复合逆转录病毒DNA构造中精确地拼接基马干涉序列.
• 建立一种在各种细胞系统中表达基因的方法.

主要方法:

• 重组逆转录病毒DNA的构造,携带特定的重链 (H) 变异多样性结合 (VH-D-JH) 和C玛1基因.
• 利用不同物种的基因来创建基因组的构造.
• 对基因拼接的分析,以确认干预序列的精确去除.

主要成果:

• 成功构建了编码基因的复合逆转录病毒DNA.
• 确认了基马体中间序列的精确拼接.
• 展示了一种在大肠杆菌,酵母和动物细胞中表达基因的方法.
• 观察到隐藏的拼接供体部位的意外使用,导致没有领导序列的V区域形成.

结论:

• 开发的程序有效地构建了基因基因的基因 - - 基因基因 - - 基因基因.
• 这种方法可以促进这些基因在多种细胞系统中的表达,从而产生潜在的治疗应用.
• 意想不到的拼接事件突显了V区域基因形成的新方面.