稳定的体外光用于增强的感染模型的实时成像Batrachochytrium dendrobatidis
Rebecca J Webb1,2, Andrea L Vu2, Lee F Skerratt1
1Faculty of Science, One Health Research Group, University of Melbourne, Victoria, Australia.
PloS one
|August 29, 2024
概括
研究人员开发了一种新的光记者系统,用于追踪两动物细胞系中的Batrachochytrium dendrobatidis (Bd) 感染. 这种方法增强真菌入侵和生长的实时成像,有助于了解菌病原体.
科学领域:
- 两动物病理学 两动物病理学
- 微生物的病原发生.
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 两生物菌病是由Batrachochytrium dendrobatidis (Bd) 引起的,对全球两生物多样性构成重大威胁.
- 目前用于研究Bd的体外模型往往缺乏现实性或需要使用动物.
- 开发先进的感染模型对于理解Bd病原体和设计缓解策略至关重要.
研究的目的:
- 增强实验室感染模型,用于研究两动物菌菌.
- 开发一种实时,非破坏性观察Bd-宿主细胞相互作用的方法.
- 为未来对Bd毒性因子的遗传研究奠定基础.
主要方法:
- 用TdTomato (RFP) 记者基因通过光标签的电穿孔转换Bd.
- 使用的两动物 (A6) 和肺纤维细胞 (DWJ) 细胞系,感染了GFP记者.
- 采用活细胞成像来观察宿主细胞内的Bd入侵和生长.
主要成果:
- 成功生成了稳定的,光标记的Bd变换器 (RFP).
- 在A6和DWJ两种细胞系中证明了成功感染和转化Bd的生长.
- 使用双色光 (RFP / GFP) 实现了真菌入侵和细胞内生长的持续,实时观察.
结论:
- 光记者系统显著增强了基于两动物细胞系的Bd.的体外感染模型.
- 这种技术可以在没有破坏性采样的情况下,立即和持续地观察感染动态.
- 开发的模型为未来研究Bd毒性和基因操纵提供了一个有价值的平台.
