针对SARS-CoV-2及其在糖基工程Pichia pastoris中产生的变种的保护性RBD-二元疫苗

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 疫苗学 疫苗学 疫苗学
• 结构生物学 结构生物学

背景情况:

• 开发针对新出现的SARS-CoV-2变种的有效和可扩展的疫苗对于控制COVID-19至关重要.
• 之前的SARS-CoV-2受体结合域 (RBD) 模态疫苗是在哺乳动物细胞中生产的.
• 需要替代的表达系统,这些表达系统具有成本效益,并允许可扩展的生产.

研究的目的:

• 探索Pichia pastoris酵母表达系统用于产生SARS-CoV-2 RBD-二极管免疫原体.
• 为了设计P. pastoris减少糖化和改善蛋白质生产.
• 评估酵母衍生RBD-二分体疫苗的免疫性和结构性质.

主要方法:

• 通过删除OCH1和过度表达HIS4基因来创建GSΔOCH1pAO的工程P. pastoris (GS菌株).
• 截断的RBD-二分蛋白来去除裂变部位以提高稳定性.
• 生产和净化均的RBD-二元蛋白质.
• 通过冷电子显微镜 (cryo-EM) 确定了RBD-二极体-抗体复合物的结构.
• 在小鼠模型中评估了抗体反应.

主要成果:

• 工程P. pastoris成功地产生了同质的RBD-二元蛋白质,减少了糖化.
• 化EM结构揭示了RBD-二元体上完全暴露的免疫表位.
• 酵母衍生的RBD-二分体诱导了小鼠的强大和保护性抗体反应.
• 帕斯托里斯 (P. pastoris) 系统证明了可扩展的疫苗生产的可行性.

结论:

• 皮奇亚牧草是一种可行的和有前途的平台,用于生产SARS-CoV-2 RBD-二极管免疫原体.
• 这种酵母表达系统促进了COVID-19疫苗的持续更新和可扩展的生产.
• 开发的平台为下一代SARS-CoV-2疫苗提供了具有成本效益的方法.