使多重成像灵活:将必要标记物与已建立的抗体面板结合起来

科学领域:

• 生物医学研究的研究.
• 免疫组织化学 免疫组织化学
• 分子病理学分子病理学

背景情况:

• 多复合免疫光 (IF) 能够在组织样本中同时检测多个生物标志物.
• 目前的方法通常依赖于反体结合的代循环,这可能是耗时的,并产生不可重现的结果.
• 在抗体兼容性和可复制性方面存在局限性,与现有的内部和商业结合套件相结合.

研究的目的:

• 在PhenoCycler平台上开发和验证多重免疫光 (IF) 的新方案.
• 克服与抗体结合相关的挑战,包括抗体选择和可再生性的限制.
• 为各种组织类型的多重生物标志物分析提供强大的和可适应的工作流程.

主要方法:

• 一种结合初级抗体手动间接免疫光 (IF) 的协议,其次是抗体化.
• 随后在PhenoCycler平台上使用商业预结合抗体的多重组面板进行染色.
• 详细的新鲜冷和甲固化嵌 (FFPE) 组织部分的详细协议,包括图像的同登记.

主要成果:

• 展示可重复和高效的多重化IF工作流程.
• 在新鲜冷和FFPE组织截面上成功应用该协议.
• 通过对图像的共同注册和展示两个案例示例来验证工作流.

结论:

• 本方案为复合IF提供了传统抗体结合方法的可行替代方案.
• 这种方法提高了使用PhenoCycler系统进行生物标志物研究的灵活性和可重复性.
• 该工作流程通过有效地检测多重生物标志物来促进先进的空间生物学研究.