通过功能化染色树脂净化腺相关病毒 (AAV) 的血清型异性亲和度
Shriarjun Shastry1, Eduardo Barbieri2, Arianna Minzoni3
1Department of Chemical and Biomolecular Engineering, North Carolina State University, 911 Partners Way, Raleigh, NC 27606, USA; Biomanufacturing Training and Education Center (BTEC), North Carolina State University, 850 Oval Dr, Raleigh, NC 27606, USA.
Journal of chromatography. A
|September 1, 2024
概括
这项研究引入了一种新配体技术,用于净化腺相关病毒 (AAVs),使得血清型不可知基因疗法载体的生产具有高产量和纯度. 这一进步有望实现更实惠和更容易获得的基因疗法.
科学领域:
- 生物技术和生物加工
- 基因治疗 矢量制造 基因治疗 矢量制造
背景情况:
- 基因相关病毒 (AAV) 是基因治疗的关键载体,但它们的净化面临着现有方法的挑战.
- 目前的染色学技术缺乏血清型通用性,产量效率,并可能损害矢量完整性.
- 需要针对各种AAV血清型进行可扩展,具有成本效益和强大的净化策略.
研究的目的:
- 开发和验证一种用于腺相关病毒 (AAVs) 的血清型不可知亲和性净化技术.
- 评估新型联体对AAV捕获,产量,纯度和分离的性能.
- 评估性稳定变体的稳定性和可重复使用性,用于工业基因疗法制造.
主要方法:
- 开发用于针对多个AAV血清型的亲和性染色体的酸.
- 对各种AAV血清型的pH依赖性结合动力学的研究.
- 使用化进行化,并评估体/基因组产量和纯度.
- 测试性稳定变体的多循环净化和腐蚀性清洁.
主要成果:
- 使用pH依赖的亲和力相互作用证明了无血型无定性AAV捕获.
- 获得高体 (>50%) 和基因组 (>80%) 产量,污染物减少>100倍.
- 联体A10显示出高结合能力 (>10^14VP/mL) 和广泛的适用性.
- 性稳定的变种可以实现多个净化周期,而不会损失容量或质量.
结论:
- 新型配体技术为AAV净化提供了一个无血型无定型,高效和强大的平台.
- 这种方法解决了当前净化策略的关键局限性,增强了基因疗法制造.
- 开发的技术有可能显著提高基因疗法的可负担性和可访问性.
