改善复合人类胆管性淋巴激素在中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中的表达的策略
Iheb Boukari1, Samia Rourou2, Dorsaf Bouzazi3
1Laboratory of Molecular Microbiology, Vaccinology and Biotechnology Development, LR16IPT01, Biotechnology Development Group, Institut Pasteur de Tunis, University of Tunis El Manar, 1002, Tunis, Tunisia; Faculty of Sciences of Bizerte, Carthage University, 7021, Bizerte, Tunisia.
Protein expression and purification
|September 1, 2024
概括
选择正确的信号显著提高了中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞的重组蛋白质生产. 特定的增强了重组人胆腺激素 (r-hCG) 的分泌,证明了它们在生物处理中的关键作用.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 细胞生物学 细胞生物学
- 蛋白质工程是指蛋白质工程.
背景情况:
- 优化基因表达和信号对于中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中高效的异质蛋白质生产至关重要.
- 再组合蛋白质的生产严重依赖宿主细胞系统和表达策略.
研究的目的:
- 评估不同信号对 CHO-K1 细胞中复合人体胆管性腺激素 (r-hCG) 的分泌和产生的影响.
- 评估稳定的CHO池技术生产生物活性r-hCG的可行性.
主要方法:
- 稳定转染CHO-K1细胞与编码r-hCG和各种信号的表达结构.
- 从稳定的细胞池中评估r-hCG生产产量.
- 开发用于r-hCG净化的上游和下游工艺.
- 使用体外生物试验评估纯化r-hCG的生物活性.
主要成果:
- 与原生或小鼠IgGκ光链信号相比,人类血清白蛋白和人类介质素-2信号导致显著更高的r-hCG细胞外分泌 (16.59±0.02μg/ml和14.80±0.13μg/ml,分别).
- 稳定CHO池技术在研究规模生产生物活性r-hCG方面被证明是有效的.
- 该研究表明可接受的生物工艺性能和一致的产品质量.
结论:
- 信号的选择是优化CHO细胞中重组蛋白质分泌的关键因素.
- 稳定池技术为研究规模生产像r-hCG这样的功能性重组蛋白提供了一种可行的方法.
- 进一步优化表达卡塞特和信号可以增强治疗性蛋白质制造.
