使用NS0细胞系作为宿主细胞增加了人类血液凝结因子VIII的表达水平
Mahboobeh Zarei1, Elaheh Ferdosi-Shahandashti2,3, Mohsen Badalzadeh4
1Student Research Committee, Babol University of Medical Sciences, Babol, I.R. Iran.
Iranian journal of biotechnology
|September 2, 2024
概括
甲胺,米托米辛C和洛瓦斯塔丁在NS0细胞中增加了复合因子VIII (FVIII) 的表达. 这项研究显示了提高哺乳动物细胞系治疗血友病A治疗的治疗性蛋白质生产的潜力.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生化学
背景情况:
- 凝血因子VIII (FVIII) 对于治疗血友病A的治疗至关重要.
- 像NS0这样的哺乳动物细胞中的重组FVIII (rFVIII) 生产面临着低表达水平的挑战.
- 细胞循环停止方法正在探索,以提高重组蛋白的产量.
研究的目的:
- 为了研究NS0细胞中的复合B域删除FVIII (BDD-FVIII) 表达.
- 为了评估米托米辛C,洛瓦斯塔丁和梅特福林对通过细胞循环停止的FVIII分泌的影响.
主要方法:
- 通过PCDNA3-hBDDFVIII等离子体感染NS0细胞.
- 细胞被用米托米C,洛瓦斯塔丁或美特福林治疗.
- 在24小时和48小时使用RT-PCR,Dot blot和ELISA分析蛋白质表达.
主要成果:
- 这三种药物都在接受治疗的NS0细胞中增强了FVIII蛋白表达.
- 甲福林在24小时内显示出最高的表达增加 (P=0.0026).
- 线粒素C在48小时内显著增加表达 (P=0.0030).
结论:
- NS0细胞是FVIII生产的合适宿主.
- 洛瓦斯塔丁,美特福林和米托米辛C有效地增加了FVIII蛋白质的表达.
- 这些药物有可能在工业规模生产治疗性蛋白质.
