生物层干涉测量用于测量腺相关病毒囊体位数,并应用于上游和下游过程开发

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分析化学 分析化学
• 生物加工是一种生物加工.

背景情况:

• 复合腺相关病毒 (rAAV) 生产的进步需要更快,更准确的分析方法.
• 目前用于测量AAV体标位的方法可能耗时,并且缺乏优化过程所需的精度.

研究的目的:

• 评估生物层干扰计 (BLI) 方法的性能,特别是AAVX-BLI,用于高通量AAV体标位测量.
• 评估AAVX-BLI在不同rAAV血清型和上游和下游加工的不同阶段的适用性.
• 将AAVX-BLI的准确性和效率与ELISA等传统方法进行比较.

主要方法:

• 使用了八位数AAVX生物传感器,用于对rAAV血清型2,5,8和9的AAVX-BLI测量.
• 在广泛的度范围 (1 x 10^10 - 1 x 10^12 体/毫升) 和各种样本背景中测试了该方法.
• 应用AAVX-BLI在转染优化研究和在rAAV净化过程中测量动态结合能力.

主要成果:

• 与ELISA相比,AAVX-BLI在各种rAAV血清型和样本类型中显示了较小的测量方差和误差.
• 生物传感器再生能力在酸盐样本下降,而在纯化样本和超浮体样本下降.
• 该方法准确地测量了上游 (传染优化) 和下游 (净化) 环境中的体标位,与矢量基因组标位相关,并显示了树脂突破率对流速的依赖.

结论:

• AAVX-BLI是一种非常准确和灵活的方法来测量rAAV囊位数,适用于各种血清型和样本矩阵.
• 高样本吞吐量和低误差使AAVX-BLI成为现有的体标位测量技术的有价值替代品.
• 对于涉及复杂样本矩阵 (如细胞溶解物) 的应用,可能需要进一步优化生物传感器再生.