代谢网络重新连接和温度依赖的调节,以提高大肠杆菌中3 - 脱基胺的产量
Dongming Liu1, Lian Wang2, Lingling Ma2
1Science Center for Future Foods, Jiangnan University, 1800 Lihu Road, Wuxi, Jiangsu 214122, China; Engineering Research Center of Ministry of Education On Food Synthetic Biotechnology, Jiangnan University, 1800 Lihu Road, Wuxi, Jiangsu 214122, China; Jiangsu Province Engineering Research Center of Food Synthetic Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China.
Bioresource technology
|September 2, 2024
概括
研究人员对大肠杆菌进行了改造,以提高3-脱西基胺 (DHS) 的产生. 一个新的CRISPRi系统提高了DHS产量30倍,达到94.2g/L,克服了微生物细胞工厂以前的局限性.
科学领域:
- 代谢工程是代谢工程.
- 合成生物学 合成生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 3-dehydroshikimate (DHS) 是一种有价值的有机酸,具有抗氧化特性,用于化学和制药行业.
- 目前用于DHS的微生物生产方法产量低,生产率低,由于细胞生长和生产不平衡,扩大规模存在挑战.
- 克服这些局限性对于有效的工业规模DHS合成至关重要.
研究的目的:
- 为了改造一种大肠杆菌菌株以改善3-脱西基酸盐 (DHS) 的生产.
- 开发一种动态基因表达系统,以平衡细胞生长和DHS合成.
- 为了实现高度,高产量和高生产率的DHS发酵.
主要方法:
- 通过淘汰竞争和降解途径并平衡关键酶,对大肠杆菌进行基因工程.
- 基于CRISPR干扰 (CRISPRi) 的温度响应多组件抑制系统的开发,以控制pykF和aroE基因表达.
- 在5L生物反应器中优化发酵.
主要成果:
- 工程化大肠杆菌菌株实现了12.2g/L的初始DHS标位.
- 该CRISPRi系统动态控制基因表达,导致DHS标题增加30倍.
- 在经过33小时的发酵后,DHS标位达到94.2g/L,生产率为2.8g/L/h,葡萄糖转化率为55%.
结论:
- 开发的代谢工程策略和动态基因控制系统显著提高了大肠杆菌中DHS的产生.
- 这项研究为DHS及其衍生物的工业规模合成提供了一个强大的平台.
- 这些发现为优化微生物细胞工厂用于复杂有机酸生产提供了宝贵的见解.


