在lentiviral载体生物处理中的自转化:定量评估和一种新的抑制策略
Thomas Williams-Fegredo1,2, Lee Davies1, Carol Knevelman1
1Oxford Biomedica (UK) Limited, Oxford, UK.
Biotechnology and bioengineering
|September 8, 2024
概括
减少lentiviral 载体自传递可以改善生产. 在lentiviral载体制造过程中降低细胞外pH值显著减少载体损失,提高细胞和基因疗法的效率.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 基因治疗 基因治疗
- 过程优化 过程优化
背景情况:
- 病毒载体对于细胞和基因疗法至关重要,对大规模制造的需求日益增加.
- 在lentiviral载体生产中的一个重大挑战是自转导,其中生产细胞被新形成的病毒颗粒重新感染.
- 这种自传导导致功能性病毒载体颗粒的大量损失,影响整体过程效率.
研究的目的:
- 量化因在上游生产过程中的自传导而导致的lentiviral载体粒子损失.
- 研究抑制自转导和改善lentiviral载体生产动态的方法.
- 开发一种可扩展和具有成本效益的策略,以加强晶状病毒载体制造.
主要方法:
- 通过测量功能性lentiviral载体颗粒的损失来量化自传感.
- 研究了细胞外pH值对自传导的影响,特别是对于带有囊性口腔炎病毒G蛋白的伪型载体.
- 在载体生产过程中实现了转移后的pH转移到降低的细胞外pH (6.7-6.8).
主要成果:
- 在没有干预的情况下,超过60%的功能性lentiviral载体颗粒因自身转导而丢失.
- 降低的细胞外pH值 (6.7-6.8) 显著抑制了自身转导,使载体基因组整合事件减少了七倍.
- pH转移策略导致了改善的lentiviral载体生产动力学.
结论:
- 自动转导是lentiviral载体制造中的一个主要的,在很大程度上没有解决的低效率问题.
- 在生产过程中降低细胞外pH值是一种有效的策略,可以抑制自转导并改善载体产量.
- 拟议的基于pH的方法提供了一个可扩展,具有成本效益和工业相关的方法来增强lentiviral vector生物处理.
