为BCR-ABL1 P210测量建立基因组RNA参考材料
Yi Yang1,2, Xia Wang1, Chunyan Niu1
1Center for Advanced Measurement Science, National Institute of Metrology, Beijing, 100029, China.
Analytical and bioanalytical chemistry
|September 9, 2024
概括
通过使用数字PCR开发了BCR-ABL1 P210融合突变的新基因组RNA参考材料. 这种参考材料确保了慢性髓性白血病 (CML) 的准确监测,并提高了实验室间的可重复性.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
- 临床诊断 临床诊断 临床诊断
背景情况:
- 准确量化BCR-ABL1对于监测慢性髓性白血病 (CML) 至关重要.
- 定量逆转录酶聚合酶连锁反应 (RT-PCR) 需要可靠的RNA参考材料.
- BCR-ABL1 P210融合突变是CML的一个关键指标.
研究的目的:
- 为BCR-ABL1 P210融合突变开发和描述一个基因组RNA参考材料 (RM).
- 建立使用逆转录数字PCR (RT-dPCR) 的绝对定量方法来进行RM表征.
- 评估开发的RM的同质性,稳定性和实验室间可重复性.
主要方法:
- 开发一种含有BCR-ABL1 P210融合突变的基因组RNA RM.
- 建立一种使用单步逆转录数字PCR (RT-dPCR) 的绝对定量方法.
- 通过RT-dPCR分析评估RM的一致性和稳定性.
- 在八个不同的实验室中评估实验室间可重复性.
主要成果:
- 该RT-dPCR方法表现出高精度和分析灵敏度,在104-101副本/反应的动态范围中具有出色的线性 (R2 0.99).
- 开发的RM被发现是均的,在 -80°C下稳定24个月.
- 实验室间可重复性测试显示,在BCR-ABL1/ABL1比率测量中,变化系数低 (CV <2.0%),结果一致.
结论:
- 开发的基因组RNARM适用于在BCR-ABL1融合基因突变检测中建立计量可追溯性.
- RM可以用于诊断测试实验室的质量控制,监测CML.
- 这一进步支持在临床环境中对BCR-ABL1进行标准化和可靠的量化.
