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Updated: May 6, 2026
09:03
Extraction of Extracellular Vesicles from Whole Tissue
Published on: February 7, 2019
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无标签的多重反应监测质谱测量用于从细胞外囊中定量类
Dong Wei1, Jie Sun1, Zhuojun Luo1
1State Key Laboratory of Bioelectronics, National Demonstration Center for Experimental Biomedical Engineering Education, Southeast University, Nanjing 210096, China.
Analytical chemistry
|September 12, 2024
概括
这项研究引入了一种使用合成的无标签方法,用于量化细胞外囊泡 (EVs) 中的蛋白质酸化. 这种方法提高了潜在的临床应用在疾病生物标志物发现的准确性.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 蛋白质组学是指蛋白质组学.
- 生物标志物发现发现
背景情况:
- 细胞外囊泡 (EVs) 越来越多地被探索为疾病标志物.
- 蛋白质后翻译性修饰 (PTMs),就像酸化一样,在EV中是稳定的.
- 在临床应用中,对EV蛋白的定量测量至关重要.
研究的目的:
- 为量化EV蛋白酸化制定一个无标签 (LF) 多重反应监测 (MRM) 策略.
- 用合成脂 (phos-iRT) 作为内部标准和局部规范化方法.
- 优化EV丰富方法,并将量化策略应用于前列腺癌 (PCa) 患者样本.
主要方法:
- 开发了一种无标签 (LF) 多重反应监测 (MRM) 试验.
- 作为内部标准,采用了合成脂组 (phos-iRT).
- 实施了局部规范化方法,以提高量化准确度.
- 优化了EVTOP方法,用于从EVs中化丰富.
- 应用该方法来量化PCa患者和健康个体尿液EV中的光.
主要成果:
- 对于EV样本,LF-MRM方法显示了广泛的线性动态范围 (10-1000 ng/mL) 和高精度 (82.4-116.8%).
- 该方法显示了良好的精度和最小的矩阵效应.
- 使用基于LF-MRM的局部规范化实现了EVTOP缩方法的优化.
- 从PCa患者和健康对照中成功量化尿液EV中的光.
结论:
- 建立了一个强大的,无标签的MRM战略,用于EV蛋白量化合成脂标准.
- 开发的方法提供了一种优越的替代方法,可以在没有同位素内部标准的情况下量化.
- 这种方法在临床研究中广泛适用于基于MRM的EV光量化,特别是用于疾病生物标志物的发现.
