开发一种双抗体三明治ELISA,用于量化米中突变的EPSPS基因表达

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 植物科学 植物科学
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 对转基因作物来说,抗 gliphosate 耐药性至关重要.
• 米EPSPS基因的突变赋予了高抗 gliphosate 的能力.
• 量化OsmEPSPS蛋白对于开发耐草甘作物至关重要.

研究的目的:

• 开发一种方便,稳定和敏感的方法来量化OsmEPSPS蛋白质.
• 为了验证开发的方法检测OsmEPSPS在转基因大米.

主要方法:

• 开发一个双抗体三明治定量ELISA (DAS-ELISA).
• 使用一种特定的单克隆抗体来捕获OsmEPSPS和一种HRP结合的多克隆抗体.
• 在转基因大米系中量化了OsmEPSPS表达,并通过西式涂抹验证.

主要成果:

• 用DAS-ELISA方法证明了线性检测范围为16-256 ng/mL.
• 该试验显示了强大的集体内和集体间可重复性 (%CV:0.17%-7.24%).
• 转基因大米系中的osmEPSPS表达在54.44-445.80μg/g之间.

结论:

• 开发的DAS-ELISA是一种可靠和稳定的方法,用于在转基因大米中检测OsmEPSPS.
• 这种方法支持开发和评估抗草甘作物的安全性.
• 精确的蛋白质定量是推动转基因作物技术发展的关键.