再组合聚合酶放大与CRISPR/Cas12a检测系统相结合,用于快速视觉检测猪环状病毒3
Genghong Jiang1,2, Xiaoyu Yang1,2, Zhaoyang Li1,2
1Department of Preventive Veterinary Medicine, College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China.
Animals : an open access journal from MDPI
|September 14, 2024
概括
使用重组酶聚合酶放大 (RPA) 和CRISPR/Cas12a的新型视觉检测方法提供了快速,灵敏和特定的猪病毒3型 (PCV3) 鉴定. 这些工具对于控制新出现的猪病至关重要.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 分子诊断学 分子诊断
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 猪病毒3型 (PCV3) 导致新出现的猪皮肤炎和病综合征 (PDNS) 类疾病.
- 目前没有有效的PCV3疫苗和治疗方法.
- 快速,敏感和特定的诊断方法对于PCV3控制至关重要.
研究的目的:
- 为PCV3.3开发新的视觉检测方法.
- 使用复合酶聚合酶放大 (RPA) 和CRISPR/Cas12a技术.
- 为了及时识别和管理PCV3疫情.
主要方法:
- 开发PCV3.3的单和双视觉检测试验.
- 重组酶聚合酶放大 (RPA) 与CRISPR/Cas12a的整合.
- 使用病毒DNA验证针对常见猪病毒的特异性和敏感性.
主要成果:
- 开发的RPA-CRISPR/Cas12a方法没有与其他八种猪病毒交叉反应.
- 最低检测极限低至5个和病毒DNA的两个副本,表明高度敏感.
- 在30分钟内检测临床样本,与实时定量聚合酶连锁反应 (qPCR) 达到了100%的一致性.
结论:
- 单和双RPA-CRISPR/Cas12a测定都对PCV3检测具有高度敏感性和特异性.
- 这些视觉方法为PCV3.3的快速现场诊断提供了显著的潜力.
- 开发的测定可以帮助有效预防和控制猪PCV3感染.


