无消化中下质谱法,用于从抗体-药物结合物中绝对量化结合有效载荷

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.

背景情况:

• 抗体药物合物 (ADC) 是一种先进的治疗药物,旨在针对性地传递有效载荷,最大限度地降低系统毒性.
• 现有的生物分析方法,如LC-MS和LBA在量化ADC方面面临挑战,特别是那些具有不可切割的链接器的ADC.
• 准确的药物抗体比率 (DAR) 确定对于ADC的表征和质量控制至关重要.

研究的目的:

• 开发一种新的,无消化中下质谱法 (DF-MDMS) 方法,用于ADC中合有效载荷的绝对量化.
• 解决目前用于量化不可切割链接器ADCs的方法的局限性.
• 为ADC生物分析和早期发现提供高吞吐量,资源高效的方法.

主要方法:

• 开发一种无消化中下质谱法 (DF-MDMS) 技术,利用碰撞诱导的解离.
• 应用DF-MDMS方法来量化四种不同的ADC的合有效载荷,包括trastuzumab和emtansine (一种不可切割的链接ADC).
• 测试灵敏度和动态范围与传统的酶分离方法的比较.

主要成果:

• 新的DF-MDMS方法成功地实现了可切割和不可切割链接器ADC对合有效载荷的绝对量化.
• 发现测试灵敏度与传统的基于酶的分离方法相比较.
• 动态范围受到有效载荷电离,解离效率,DAR和物种丰度的影响.

结论:

• 开发的无消化中下质谱方法为ADC生物分析和表征提供了强大而高效的解决方案.
• 这种方法简化了样本的准备和分析,节省了时间和资源,特别是用于早期药物发现.
• 该DF-MDMS技术显示出高通量选和各种ADC格式的表征的巨大潜力.