在宿主-病原体相互作用期间对人类M1和M2单细胞衍生的巨细胞进行脂质媒介特征分析和表型定型的协议
Kerstin Günther1, Christina Ehrhardt2, Oliver Werz3
1Department of Pharmaceutical/Medicinal Chemistry, Institute of Pharmacy, Friedrich Schiller University Jena, Philosophenweg 14, 07743 Jena, Germany.
STAR protocols
|September 21, 2024
概括
这项研究详细介绍了分离人类免疫细胞并准备它们用于脂质媒介特征的协议. 它涵盖单细胞分离,分化为巨细胞,以及刺激以进行后续分析.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 脂质介质在免疫反应中起着至关重要的作用.
- 准确的分析需要准备好的免疫细胞.
- 现有的协议可能缺乏人类细胞隔离和刺激的全面步骤.
研究的目的:
- 介绍一项用于初级人体免疫细胞隔离和刺激的详细方案.
- 为了实现强大的脂质介质概况.
- 为了促进免疫细胞功能的下游分析.
主要方法:
- 从人类白细胞缩物中分离单细胞,使用密度离心法.
- 单细胞的分化和两极化成M1或M2单细胞衍生巨细胞 (MDMs).
- 用活细菌或A型流感病毒刺激MDM.
主要成果:
- 准备人类免疫细胞进行脂质媒介分析的综合性协议.
- 后续分析的方法,包括酶表达,mRNA分析和表面标记物的确定.
- 针对感染性病原体相关的免疫细胞刺激的标准化方法.
结论:
- 本方案提供了一种可靠的方法,用于人类免疫细胞的隔离和刺激.
- 这有助于进行深入的脂质介质分析和了解免疫细胞反应.
- 该协议支持各种下游分析,用于全面的免疫细胞表征.
