开发一种高吞吐量细胞染色体P450连体结合试验

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.
• 药物发现 药物发现 药物发现

背景情况:

• 人类细胞染色体P450酶对于代谢异生菌和内源性化合物至关重要.
• 了解小分子与P450活性位点的相互作用对于药物设计至关重要.
• 传统的方法来表征连接结合是耗时和资源密集的.

研究的目的:

• 开发和验证一个半自动化,高通量选试验的人类细胞染色体P450酶.
• 描述含有伊米达的化合物与药物代谢和固醇代谢的P450s的结合.
• 为了能够快速生成药,并促进药物发现工作.

主要方法:

• 传统的基于吸收的光谱测试对384井的半自动化高通量选进行了调整.
• 对I型和II型光谱变化测试的验证.
• 对大约100种伊米达化合物的查,以检测它们是否有CYP2A6,CYP2D6和CYP8B1酶.

主要成果:

• 高吞吐量测定增加了吞吐量50倍,减少了蛋白质和溶剂的需求.
• 观察到伊米达化合物与CYP2A6,CYP2D6和CYP8B1的结合差异,产生独特的结合指纹.
• 获得的K_d值被用于产生药,与实验X射线结构相关联.

结论:

• 开发的高通量试验对表征P450-联结体相互作用是有效的.
• 这种测定有助于制药体生成,P450孤儿配体识别和抑制剂查.
• 它有助于评估P450代谢的新药候选药物,并验证计算预测.