光标记内源的IRS2与依赖于auxin的降解子,以评估动态细胞内定位和功能
Minjeong Jo1, Ji-Sun Lee1, Claire E Tocheny1
1Department of Molecular, Cell & Cancer Biology, University of Massachusetts Chan Medical School, Worcester, Massachusetts, USA.
The Journal of biological chemistry
|September 21, 2024
概括
胰岛素受体基质2 (IRS2) 蛋白调节乳腺癌的生长和转移. 新的研究表明,IRS2在细胞区间之间穿,并且降低其水平可以抑制瘤细胞的入侵,这表明IRS2是治疗点.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 癌症研究 癌症研究
- 细胞信号传递 细胞信号传递
背景情况:
- 胰岛素受体基质2 (IRS2) 是胰岛素 (IR) 和胰岛素类生长因子-1 (IGF-1R) 受体的关键信号蛋白.
- 在乳腺癌发病,转移,癌症干细胞 (CSC) 功能和侵袭中,IRS2起着至关重要的作用.
研究的目的:
- 为了研究IRS2在乳腺癌中的各种功能背后的不太了解的机制.
- 开发和利用一种新的模型来研究内源的IRS2表达,定位和功能.
主要方法:
- 通过CRISPR/Cas9基因编辑,在内源IRS2的N端引入了辅酶诱导降解 (AID) 标签,3x-FLAG标签和mNeon绿色光蛋白.
- 现场光成像以跟踪IRS2的定位和动态.
- 调查PI3K信号和核出口在IRS2细胞内贩运中的作用.
主要成果:
- 内生IRS2以PI3K依赖的方式在细胞质和细胞核之间穿.
- 核出口的抑制或核出口序列的删除导致IRS2核保留.
- 急性降解IRS2显著减少乳腺癌细胞入侵.
结论:
- IRS2 细胞内定位受核出口机制的调节.
- 准IRS2降解是一种潜在的治疗策略,可以抑制乳腺癌的侵袭和转移.
- 开发的内源标记IRS2模型是研究IRS2生物学的一个有价值的工具.
