使用MicroTissues模具系统的3D乳腺癌模型的形成,染色和成像协议
Ben Haspels1, Maayke M P Kuijten1
1Department of Molecular Genetics, Erasmus MC, 3000 CA, Rotterdam, the Netherlands; Oncode Institute, Erasmus MC Cancer Institute, Erasmus MC, 3015 GD, Rotterdam, the Netherlands.
STAR protocols
|September 22, 2024
概括
这项研究优化了使用微组织模具进行治疗反应研究的3D乳腺癌模型. 该协议详细介绍了球状和棒状微组织的形成,治疗和分析,以改善癌症药物发现.
科学领域:
- 在瘤学瘤学.
- 生物技术是生物技术.
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 传统的二维细胞培养在准确建模瘤微环境方面存在局限性.
- 3D癌症模型为研究治疗反应提供了一个更具生理相关性的平台.
- 开发用于3D模型生成的强大的协议对于推进癌症研究至关重要.
研究的目的:
- 通过使用MicroTissues模具系统创建3D乳腺癌微组织 (球形和棒形) 的优化协议.
- 详细介绍处理这些3D模型的DNA损伤剂的方法.
- 在3D乳腺癌模型中评估治疗反应的分析技术.
主要方法:
- 利用微组织模具系统来形成乳腺癌球体和棒状微组织.
- 已建立的造形成和随后用DNA破坏剂处理的程序.
- 在固定样品中采用全免疫染色和共聚焦成像.
- 集成的实时细胞记者用于实时分析细胞反应.
主要成果:
- 成功优化了一种可再生3D乳腺癌微组织形成的协议.
- 证明了用基因毒剂治疗这些3D模型的可行性.
- 经过验证的分析方法,用于评估治疗后3D模型中的细胞和结构变化.
结论:
- 本方案为生成和分析3D乳腺癌模型提供了一种有效的方法.
- 这些3D模型对研究治疗反应的2D培养具有优势.
- 这种优化的方法有助于更深入地了解乳腺癌研究中的药物疗效和机制.
