在本地和人工软骨中TGF-β活动的基于自诱导的量化
Tianbai Wang1, Sung Yeon Kim2,3, Yifan Peng2
1Division of Materials Science & Engineering, Boston University, Boston, Massachusetts, USA.
Tissue engineering. Part C, Methods
|September 23, 2024
概括
一种新方法量化了活软骨中的转化生长因子β (TGF-β) 活性,使用潜伏的TGF-β (LTGF-β) 作为生物标志物. 这种方法可以在工程和原生组织中准确,非破坏性地测量TGF-β.
科学领域:
- 生物材料科学 生物材料科学
- 组织工程是组织工程.
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 转化生长因子β (TGF-β) 对于软骨平衡至关重要,并用于组织工程.
- 量化TGF-β活体三维组织中的活体活动in situ是当前方法的挑战.
- 现有的技术,如西方抹杀或记者测试,不适合在复杂组织中直接测量.
研究的目的:
- 开发一种用于在现场定量活软骨TGF-β活性的新平台.
- 确定潜伏TGF-β (LTGF-β) 作为TGF-β活动的非破坏性,无标签的生物标志物.
- 用本地和工程软骨模型验证平台.
主要方法:
- 利用TGF-β的自诱导反应,其中活性TGF-β刺激细胞分泌潜伏的TGF-β (LTGF-β).
- 测量LTGF-β1分泌水平使用异形特异性ELISA在牛原生软骨实验体和工程结构中.
- 暴露于不同剂量的活性TGF-β3的组织,并分析了LTGF-β的分泌和保留.
主要成果:
- 随着活性TGF-β的暴露,LTGF-β的分泌量增加了 (原生软骨的7.4倍,工程软骨的6.6倍).
- 合成的LTGF-β在原生和人工软骨组织中保持率低.
- 分泌的LTGF-β在条件介质中保持稳定两周,允许生成标准曲线.
结论:
- 细胞分泌的LTGF-β是一种可靠的生物标志物,用于量化in situTGF-β活软骨中的活性.
- 开发的平台准确地测量了在生理负荷下 (高达0.59 ng/mL) 在本地软骨中的TGF-β活性.
- 该方法成功量化了用于组织工程的TGF-β结合支架中的TGF-β活动 (1.81 ng/mL).
