将抗毒素和蓝白查与parAB/resolvase突变结合起来,作为一种针对Salmonella spp.的策略. 塑固化固化等离子体

科学领域:

• 微生物学和分子生物学
• 细菌遗传学和等离子体生物学

背景情况:

• 等离子体对于细菌的适应,毒性和抗生素耐药性至关重要.
• 产生无等离子体细菌菌株的高效工具对于研究等离子体作用至关重要.
• 现有的等离子体治愈方法往往是低效的,并受到宿主成系统的阻碍.

研究的目的:

• 开发和验证用于细菌中高效的等离子体治愈的新型载体工具.
• 针对等离子体稳定系统 (parAB,res),同时抵消宿主成机制.
• 建立一种视觉查方法,用于识别用等离子体治愈的殖民地.

主要方法:

• 通过吉布森组装开发pDG1和pDG2载体,用于通过吉布森组装删除基因.
• 创建表达抗毒素的pDG-At和pDG-Atπ辅助等离子体.
• 在IncFIB,Inca/C和IncX4等质体上有针对性的删除parAB或res基因.
• 使用bgaB记者基因进行蓝白查,以可视识别治愈的殖民地.

主要成果:

• 这种pDG-Atπ助手等离子体使等离子体愈合成为可能,约80%的殖民地丢失了IncFIB等离子体.
• 蓝白查有助于可视检测等离子体治愈的殖民地,避免了繁的查.
• 开发的方法显示出有希望的结果,但需要进一步改进以提高可复制性和更广泛的应用.

结论:

• 针对等离子体稳定系统的矢量工具与抗毒素补充相结合,为等离子体固化提供了一种可行的方法.
• 在蓝白查中使用bgaB简化了无等离子体细胞的识别.
• 这种方法为适用于各种细菌病原体的通用等离子体治愈系统奠定了基础.