绝对定量人血清囊素C:通过¹⁵N标记的重组蛋白质同位素稀释的候选参考方法UPLC-MS/MS

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 临床化学 临床化学
• 分析化学 分析化学

背景情况:

• 血清囊素C (CysC) 是一个优越的内源标志物,与肌素相比,对膜过率 (GFR) 具有优越的内源标志物.
• 精确测量血清CysC对于精确的GFR估计和早期发现病至关重要.
• 现有的方法可能有局限性,需要开发更精确的量化策略.

研究的目的:

• 开发和验证一种高精度的LC-MS/MS方法,用于血清CysC.的绝对量化.
• 使用氨基酸RMP.建立可追溯到参考测量程序 (RMP) 的可追溯性.

主要方法:

• 在蛋白质分裂后使用了全长的CysC和一个标有15N的CysC内部标准.
• 液体染色学-双重质谱法 (LC-MS/MS) 用于绝对量化.
• 使用氨基酸参考材料和RMP.的方法可追溯性被确定.

主要成果:

• 该方法表现出高精度 (总不精度≤8.2%) 和低量化极限.
• 恢复率在97.36%至103.26%之间,相对于经过认证的参考材料,相对偏差为1.74%.
• 在0.21-10.13 mg/L范围内观察到出色的线性 (R2 = 0.999),结果与其他认证的RMP一致.

结论:

• 已经建立了一种高度选择性和准确的LC-MS/MS方法来测量血清CysC.
• 这种方法可以对血清CysC进行可靠的评估,在出现差异时,可以更好地评估免疫检测结果.
• 经过验证的方法支持改善GFR和功能的临床评估.