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Updated: Jun 12, 2025
08:31
Detection of Protein S-Acylation using Acyl-Resin Assisted Capture
Published on: April 10, 2020
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一个综合策略,从治疗性蛋白质中识别氨酸硫化
Eunju Jang1, Fengfei Ma2, Daniela Tomazela1
1Protein Sciences, Discovery Biologics, Merck & Co., Inc., South San Francisco, California 94080, United States.
Journal of the American Society for Mass Spectrometry
|September 26, 2024
概括
在生物治疗中检测氨酸硫化是具有挑战性的. 这项研究提出了一种快速,综合的策略,结合了in silico预测,LC-MS和SCX-MS,以确定治疗性蛋白质中的氨酸硫化和其他关键质量属性.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 生物技术是生物技术.
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 翻译后修改 (PTM) 是影响生物治疗疗效和安全的关键质量属性.
- 氨酸硫化对于蛋白质与蛋白质相互作用至关重要,但在治疗性蛋白质中很难检测到.
研究的目的:
- 建立一个完整和快速的策略,以确定生物治疗蛋白中的氨酸硫化.
- 为了应对检测硫化和其他PTM的挑战.
主要方法:
- 在潜在的修改站点的形预测.
- 完整的液体染色学-质谱学 (LC-MS) 用于质量转移.
- 原生大小排除色谱学多角度光散射质谱学 (SEC-MALS-MS) 用于完整的蛋白质分析.
- 的映射,Fe3+-IMAC的丰富,和去化进行确认.
主要成果:
- 开发了一种结合in silico,LC-MS和SCX-MS的综合策略,用于快速检测PTM (<1小时).
- 在治疗性蛋白 NB1.1. 中证明了氨酸硫化和氨酸酸化的鉴定.
- 通过使用片映射和丰富技术,成功地区分了硫化和酸化.
结论:
- 开发的综合战略提供了一种快速而可靠的方法,用于初步检测潜在的关键质量属性.
- 这种方法可以首次识别单个治疗蛋白中的氨酸硫化和氨酸酸化.
- 这种方法促进了复杂生物治疗药物的表征,并确保了药物的质量和安全性.
