通过将CRISPR-Cas9核糖蛋白复合体输送到伪型的lentivirus衍生的纳米粒子中来进行针对细胞的基因修饰

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 基因编辑技术的技术
• 纳米医学是一种纳米医学.

背景情况:

• 为了获得最大的效果,CRISPR-Cas9基因组编辑需要精确和及时的交付.
• 针对性地提供基因编辑组件对于在复杂的生物系统中修改特定细胞群体至关重要.

研究的目的:

• 为了工程 lentivirus-derived纳米粒子 (LVNPs) 的目标交付的CRISPR-Cas9核糖蛋白 (RNP) 复合体.
• 通过调节LVNP伪型来证明混合细胞种群中的细胞特异性基因修饰.

主要方法:

• 用病毒葡萄糖蛋白 (SARS-CoV-2尖端,尼帕病毒,麻疹病毒) 伪造LVNP以准特定的细胞表面受体 (ACE2,以林-B2 / B3,CD46,SLAM).
• 在各种细胞类型 (包括初级B细胞) 中评估了Cas9/sgRNA RNP传递和随后的基因编辑 (形) 的效率.

主要成果:

• 在SARS-CoV-2伪型LVNP中介的ACE2-依赖基因编辑.
• 尼帕病毒伪型LVNP实现了以弗林-B2 / B3 特定基因淘汰.
• 麻疹病毒伪型LVNP (MV-H/F和MV-H/F-SLAM) 证明了Cas9/sgRNA RNP对CD46+和SLAM+细胞的有效和特异性传递,在初级B细胞中实现了高的indel率.

结论:

• LVNP提供了一个模块化平台,用于传递CRISPR-Cas9/sgRNA复合体.
• 工程LVNP伪型允许精确的基因编辑针对基于表面受体表达的特定细胞亚群的精确向.
• 这种方法可以在定义的细胞子集中进行有效的基因修改,从而增强了CRISPR-Cas9技术的实用性.