一种新的实时简单方法来测量内源性缩酶活性 (Nar) 在Paracoccus denitrificans和其他脱细菌中
José J García-Trejo1, Sharon Rojas-Alcantar1, Monserrat Alonso-Vargas2
1Departamento de Biología, Facultad de Química, Universidad Nacional Autónoma de México (U.N.A.M.), Ciudad de México 04510, Mexico.
International journal of molecular sciences
|September 28, 2024
概括
一种新的实时测定,Nar-JJ,测量了跨膜酸盐还原酶 (Nar) 在原生细菌膜中的特定活性. 这种低成本,可复制的方法适用于各种无化细菌.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 生物化学 生物化学
- 酶学 是一种酶学.
背景情况:
- 跨膜酸盐还原酶 (Nar) 对于无氧呼吸在脱细菌中至关重要.
- 现有的方法缺乏实时测量本地膜内的Nar活动.
研究的目的:
- 开发一种新的实时方法来确定特定的Nar活动在现场.
- 为了验证测试在不同无化细菌物种中的适用性.
主要方法:
- 在无氧条件下利用*Paracoccus denitrificans*的内外膜.
- 通过子池利用内源性NADH脱酶 (复合物I) 与Nar还原的合.
- 通过化和化的抑制,证实了Nar的特异性.
主要成果:
- 成功测量了P. denitrificans*中的实时内源性Nar活动.
- 确定了Nar对NO3的迈凯利斯-门亲和力 (Km) 为70.4μM.
- 证明了对 *Brucella canis* 和潜在的其他肠道病原细菌的测试适用性.
结论:
- 该Nar-JJ试验提供了一个合适的,低成本的,可重复的实时Nar活动确定方法.
- 这种测试促进了对不同细菌群体中酸盐呼吸的研究.
- 能够进一步研究Nar在各种微生物环境中的功能和调节.


