建立一个基于Cas12a的视觉检测方法,涉及PMNT用于Colletotrichum gloeosporioides的物种复杂
Liu Zheng1,2, Wei Jiang3, Xiaohua Zou1
1Shanghai Key Laboratory of Protected Horticultural Technology, Forestry and Fruit Tree Research Institute, Shanghai Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 201403, China.
Plant disease
|September 29, 2024
概括
一种新的Cas12aVIP诊断方法可以快速检测由Colletotrichum gloeosporioides物种复合物 (CGSC) 引起的草炭. 这种简单而敏感的测试可以在50分钟内识别病原体,有助于更健康的草生产.
科学领域:
- 植物病理学 植物病理学
- 分子诊断学 分子诊断
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 由*Colletotrichum* spp.引起的草炭,显著影响草产量和质量.
- 在中国, *Colletotrichum gloeosporioides* 种群复合体 (CGSC) 是草炭病的主要原因.
- 准确和快速检测CGSC对于疾病管理至关重要.
研究的目的:
- 开发一种简单,快速和灵敏的诊断方法,用于检测草幼苗中的CGSC.
- 在现场条件下验证开发方法的有效性.
- 为了确定CGSC.的主要注射源.
主要方法:
- 开发一种Cas12aVIP诊断试验,针对*β*-素基因.
- 重组酶聚合酶放大 (RPA) 和CRISPR/Cas12a系统与阴离子结合的多衍生物 (PMNT) 的集成.
- 简化的DNA提取,RPA,CRISPR/Cas12a检测,以及视觉读取.
主要成果:
- Cas12aVIP方法显示出高灵敏度 (10个副本/反应) 和特异性,没有与相关病原体的交叉反应.
- 整个检测过程,包括简化DNA提取,大约需要50分钟.
- 在田间条件下,在自然感染的草幼苗中成功检测出CGSC.
- 识别无症状植物和植物残留物作为主要注射源.
结论:
- Cas12aVIP试验提供了一种高效,简单和可视检测的方法,用于在草中诊断CGSC.
- 这种方法不需要专门的设备或技术专业知识,促进广泛采用.
- 该试验可以通过早期和准确的疾病检测,促进更健康的草生产.
