一种基于光的试验,用于测量聚胺生物合成的aminopropyl转移酶介导的催化剂

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 分子生物学分子生物学
• 酶学 是一种酶学.

背景情况:

• 多胺是重要的多化分子,参与许多细胞过程.
• 氨基转移酶 (APT) 是聚胺生物合成中的关键酶,代表治疗点.
• 在APT研究中的一个重大障碍是缺乏高通量活动试验.

研究的目的:

• 开发和验证第一个基于光的测定方法来测量APT活性.
• 为了实现针对APT的潜在治疗化合物的高通量选.

主要方法:

• 开发使用1,2-DAB检测多氨酸的二乙 (DAB) -APT测定方法.
• 使用来自Saccharomyces cerevisiae和Plasmodium falciparum的APT酶进行测定验证.
• 使用质谱学和薄层染色学 (TLC) 验证检测结果.

主要成果:

• DAB-APT测定测量通过1,2-DAB和多氨酸 (putrescine,spermidine,spermine) 之间形成的光结合物来测量APT活性.
• 光强度与聚胺碳链长度相关.
• 质谱学确定了光添加物作为被替代的1,3-二甲基异能醇.

结论:

• 这种新型的DAB-APT测试被优化为化学库的高通量选.
• 这种分析为推进传染病,瘤学和神经生物学领域的研究和药物发现提供了强大的工具.