优化在艾姆斯试验中检测N-尼托胺突变性
Robert H Heflich1, Michelle E Bishop1, Roberta A Mittelstaedt1
1U.S. Food and Drug Administration, National Center for Toxicological Research, USA.
Regulatory toxicology and pharmacology : RTP
|September 29, 2024
概括
确定N-尼托胺药物杂质的致变性对于安全至关重要. 优化的艾姆斯测试条件,包括特定的细菌菌株和30分钟的预化30%的仓鼠肝S9,有效地检测这些突变致病危险.
科学领域:
- 制药化学 制药化学 制药化学
- 毒理学 毒理学 毒理学
- 遗传学 遗传学是一种遗传学.
背景情况:
- N-氨酸胺是药品中作为杂质发现的强有力的变异原体和致癌物.
- 准确的突变性评估对于药物安全性和监管合规性至关重要.
- 细菌逆变异性 (Ames) 试验是检测变异性潜力的标准方法.
研究的目的:
- 评估和优化测试灵敏度,以检测小分子N-胺和胺药物物质相关杂质 (NDSRI) 的致变性.
- 在Ames测试中确定最有效的条件,用于识别致变性N-尼托胺杂质.
主要方法:
- 使用艾姆斯测试测试了12种小分子N-尼托拉胺和17种NDSRI.
- 采用了五种激活条件:没有外源代谢激活,以及由诱导大鼠和仓鼠的S9肝脏10%和30%的代谢激活.
- 多种多样的预化时间 (30分钟和60分钟) 和使用的沙门氏菌typhimurium菌株 (TA98,TA100,TA1535,TA1537) 和大肠杆菌菌株WP2 uvrA (pKM101).
主要成果:
- 在29种N-尼托胺试验物质中,有18种在至少一个条件下表现出致变性.
- 使用测试菌株TA1535和WP2 uvrA (pKM101) 实现了所有18个阳性N-尼托拉胺的最佳检测.
- 一个30分钟的潜伏前期与30%的仓鼠肝S9混合物被证明是检测变异性最有效的.
- 对于NDSRI的突变性条件通常与小分子N-尼托胺的突变性条件相似.
结论:
- 该研究确定了特定的Ames测试条件,这些条件提高了检测突变性N-尼托胺杂质的灵敏度.
- 建议将测试菌株TA1535和WP2 uvrA (pKM101),30分钟的预潜伏和30%的仓鼠肝S9结合起来,以改善N-尼托拉胺变异性评估.
- 这些优化的条件对于识别与制药中的N-尼托胺杂质相关的潜在癌症危险至关重要.
