在没有DNA断裂的情况下,CRISPR启动了表观遗传编辑,用于在人类细胞中进行可编程的基因沉默

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 表观遗传学 在表观遗传学中,表观遗传学是指表观遗传学.
• 基因编辑 基因编辑

背景情况:

• 基于CRISPR的技术彻底改变了可编程基因操纵.
• 表观遗传编辑通过改变DNA和基因组的修饰来提供有针对性的基因扰乱.
• CRISPRoff是一个新的表观遗传编辑器,可以建立DNA甲基化和抑制基因素标记.

研究的目的:

• 描述一种用于将CRISPR从表观遗传编辑器传递的协议.
• 为评估CRISPRoff-mediated基因沉默提供指导.
• 要突出在基因扰乱研究中使用CRISPRoff的考虑因素.

主要方法:

• 通过等离子体DNA转染和mRNA的CRISPRoff传递.
• 在转化的人类细胞系和原发性免疫细胞中应用.
• 使用已确定的方法评估目标基因沉默.

主要成果:

• CRISPRoff在目标促进体中建立了DNA甲基化和抑制质子修饰.
• 暂时的CRISPRoff表达导致通过细胞分裂的遗传性转录抑制.
• 协议适用于各种基于CRISPR的表观遗传编辑技术.

结论:

• CRISPRoff使可编程,可遗传的基因抑制能够在没有DNA断裂的情况下实现.
• 描述的协议有助于在哺乳动物细胞中使用CRISPRoff.
• 这项技术推进了基因调节研究的表观遗传编辑领域.