来自Enterococcus faecalis (Ef) 的Sortase A的过度表达,净化和生物化学研究以及使用Aloenin的抑制研究
Suraj Singh1, Sanjit Kumar2, Immanuel Dhanasingh1
1Centre for Bio-Separation and Technology (CBST), Vellore Institute of Technology, Vellore, Tamil Nadu 632014, India.
Acta tropica
|October 1, 2024
概括
这项研究确定了来自的Aloenin-a作为Enterococcus物种中Sortase A (SrtA) 的潜在抑制剂. 氨酸有效地降低了细菌毒性因素和生物膜的形成,为抗多药耐药细菌提供了一种新的治疗策略.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 微生物学 微生物学
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
背景情况:
- 排序酶A (SrtA) 是一种关键的细菌转酶,对于Enterococcus物种等病原体的毒性至关重要.
- 抗药多种 Enterococcus 菌株构成重大威胁,需要新的治疗点.
- 由于SrtA的表面定位和在生长中不重要的作用,使其成为具有低阻力潜力的有吸引力的目标.
研究的目的:
- 为了克隆,表达和净化Enterococcus faecalis Sortase A (Ef-SrtA) 的细胞.
- 描述纯化的Ef-SrtA的酶活性.
- 为了确定从叶提取物中发现的Ef-SrtA的潜在天然抑制剂.
主要方法:
- 克隆,表达和净化Ef-SrtA使用不移金属亲和染色学 (IMAC) 和凝过.
- 酶活性测定,包括使用光基质的动力学研究.
- 针对Ef-SrtA的阿洛韦拉化合物的虚拟查和分子对接,随后进行体外抑制试验 (IC50,生物膜形成,纤维素附).
主要成果:
- 纯化的Ef-SrtA在pH 8和45-55°C时表现出最佳活性,其动力参数Vmax=3.852 μM.min-1和kcat=7.7 × 10−2 s−1.1.
- 来自的阿洛因因-a与Ef-SrtA活性部位显著结合 (-6.1 kcal/mol) 和强烈抑制 (IC50 = 20.68 μM).
- 氨酸有效抑制了Ef-SrtA介导的生物膜形成,并减少了细菌对纤维素原的粘附.
结论:
- 阿洛宁-A是一种有前途的天然抑制剂,可以抑制Enterococcus faecalis Sortase A.
- 含有Aloenin-a的草提取物可以作为对抗多药耐药Enterococcus感染的潜在治疗剂.
- 针对SrtA使用诸如Aloenin-a这样的天然化合物提供了一种可行的策略来对抗细菌毒性和抗生素耐药性.
