验证和优化红细胞中减少的谷氨的量化通过高性能液态色谱分析方法的coulometric
Stef Lauwers1, Maxim Van Herreweghe1, Kenn Foubert1
1Department of Pharmaceutical Sciences, Natural Products & Food Research and Analysis - Pharmaceutical Technology (NatuRAPT), University of Antwerp, Antwerp, Belgium.
Biomedical chromatography : BMC
|October 1, 2024
概括
这项研究提出了一种经过验证的HPLC-ECD方法,用于定量红细胞中的谷氨 (GSH). 优化的技术准确地测量GSH作为氧化应激的生物标志物.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 生物标志物 生物标志物
背景情况:
- 谷氨 (GSH) 是一种在哺乳动物组织中发现的重要抗氧化剂.
- GSH 作为评估氧化应激的关键生物标志物.
- 精确量化红细胞中的GSH对于氧化应激评估至关重要.
研究的目的:
- 开发和验证一种敏感的分析方法,用于量化红细胞中的GSH.
- 为了优化样品制备和HPLC-ECD参数,以准确测量GSH.
- 使用开发的方法,确定GSH作为氧化应激的可靠生物标志物.
主要方法:
- 使用电化学检测 (HPLC-ECD) 的高性能液体染色学.
- 样本准备涉及离心过和低压酸盐缓冲器用于GSH提取.
- 方法验证遵循国际协调理事会 (ICH) 的指导方针.
主要成果:
- 该方法证明了0.3至9.5μg/mL之间的线性,量化极限 (LOQ) 为0.11μg/mL.
- 重复性和恢复率均处于可接受的范围内 (分别为1.10%-8.57%和94.3%-106.0%).
- 红细胞样本在 -80°C下表现出长达6个月的稳定性,最大限度地减少了GSH自氧化.
结论:
- 开发的HPLC-ECD方法是敏感的,可重复的,精确的,准确的,用于定量红细胞中的GSH.
- 这种方法有效地减少了在样本制备过程中GSH自氧化.
- 经过验证的试验适用于测量红细胞GSH作为氧化应激的生物标志物.
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