工程基板在双功能烯合成酶中道化
Eliott S Wenger1, Kollin Schultz2,3, Ronen Marmorstein2,4
1Roy and Diana Vagelos Laboratories, Department of Chemistry, University of Pennsylvania, Philadelphia, PA 19104-6323.
糖二烯合成酶 (PaFS) 即使没有共价链接器,也能有效地将其 prenyltransferase 和 cyclase 域之间的基质道化. 最佳的道发生在循环酶域与prenyltransferase八合体核心相关联时.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 酶学 是一种酶学.
- 结构生物学 结构生物学
背景情况:
- 来自*Phomopsis amygdala*的菌合成酶 (PaFS) 是一种双功能酶.
- 它拥有前转移酶 (PT) 和循环酶域,由一个灵活的区域连接在一起.
- PT 域合成了格拉尼尔格拉尼尔二酸盐 (GGPP),而循环酶域将其转化为fusiococcadiene.
研究的目的:
- 调查链接器和域接近在基质通道中的作用.
- 确定GGPP在PaFS中的道化结构基础.
- 评估PaFS PT和循环酶域之间的相互作用偏好.
主要方法:
- 构建和分析一个"无链接"的PaFS变体.
- 低温电子显微镜以确定无链接结构的结构.
- GGPP竞争实验与其他二烯循环类.
主要成果:
- 对GGPP通道而言,共价联结并不是必不可少的,尽管它可能会提高效率.
- 无论链接如何,PaFS PT和循环酶域都显示出优先相互作用.
- 无链接的PaFS结构显示了循环酶域与PT八位体的灵活关联.
结论:
- 在PaFS中,通过与PT八度体的循环酶域关联来实现最佳的基质通道.
- 这种关联可以暂时发生或被锁定在位,有或没有共价链接器.
- 这些发现提供了对多域酶中基质道化机制的见解.
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