基因工程人类诱导的多能干细胞用于产生针对大脑的细胞外囊泡
Fan Tang1,2, Tao Dong1,2, Chengqian Zhou1,2
1Department of Psychiatry and Behavioral Sciences, Division of Neurobiology, Johns Hopkins University School of Medicine, 600 N. Wolfe St, Baltimore, MD, 21287, USA.
Stem cell research & therapy
|October 8, 2024
概括
经过基因工程的人类诱导的多能干细胞 (hiPSCs) 产生细胞外囊泡 (EVs),增强了对大脑的向. 这一突破通过过度表达狂犬病病毒葡萄糖蛋白 (RVG) 融合蛋白来改善EV介导的大脑药物输送.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 纳米医学是一种纳米医学.
- 神经科学是一个神经科学.
背景情况:
- 细胞外囊泡 (EVs) 是用于药物输送的天然纳米粒子.
- 人类诱导的多能干细胞 (hiPSCs) 是EV生产的有希望的来源.
- 目前的hiPSC衍生电动汽车的脑传递效率有限.
研究的目的:
- 开发一条稳定的hiPSC线路,用于生产具有增强脑准能力的EV.
- 为了设计hiPSC来过度表达狂犬病病毒糖蛋白 (RVG) 融合蛋白 (RVG-Lamp2B) 以改善大脑传递.
- 为了评估RVG修改EVs的大脑传递效率.
主要方法:
- 通过CRISPR/Cas9辅助的同源重组,将RVG-Lamp2B表达盒插入hiPSCs的AAVS1安全港位.
- 西方斑点证实RVG-Lamp2B-HA表达在编辑的hiPSC及其衍生的EV中.
- 流细胞计,以分析神经元细胞的EV吸收,以及对小鼠生物分布和大脑输送的ex vivo光成像.
主要成果:
- 成功生成了具有正常型和多能性的基因工程hiPSC.
- 在RVG编辑的hiPSC及其衍生的EV中确认了RVG-Lamp2B-HA的表达.
- 与对照EV相比,RVG修饰的EV在小鼠中的大脑传递效率有所提高.
结论:
- 建立了稳定的基因工程hiPSC,用于生产具有RVG表达的EV.
- 开发了一个有前途的平台,使用改进的EV来增强针对大脑的药物输送.
- 该RVG修改显著提高了hiPSC衍生的EVs的大脑准能力.
