使用Beacon平台从免疫小鼠中分离抗原特异单克隆抗体的协议
Meilan Fu1, Xiangwei Wang1, Shubing Tang2
1Shanghai Public Health Clinical Center, Fudan University, Shanghai 201508, China.
STAR protocols
|October 13, 2024
概括
该Beacon平台能够有效地隔离抗原特异性血B细胞. 本协议详细说明了使用Beacon来隔离细胞,测序B细胞受体 (BCRs) 和表达抗体,适用于人类样本.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 从历史上看,分离抗原特异性血B细胞是很困难的.
- Beacon平台提供了一种使用光分类技术的新解决方案.
- 单细胞的高通量选用于特定抗原识别现在是可行的.
研究的目的:
- 提出一个详细的协议,以隔离抗原特异性血B细胞.
- 展示Beacon平台用于B细胞受体 (BCR) 测序的应用.
- 概述从这些B细胞中获得的抗体的后续克隆和表达.
主要方法:
- 利用Beacon平台进行基于抗原特异性的高通量单细胞分类.
- 采用了测序技术,从隔离的血B细胞中确定B细胞受体 (BCR).
- 执行分子克隆和表达由已识别的BCRs编码的抗体.
主要成果:
- 从免疫小鼠模型中成功分离了抗原特异性血B细胞.
- 从排序的单细胞中获得B细胞受体 (BCR) 的序列.
- 从分离和测序的B细胞中获得的表达功能性抗体.
结论:
- Beacon平台提供了一种有效的方法来隔离抗原特异性血B细胞.
- 该协议促进了新型抗体的发现和开发.
- 该方法可适应用于人体样本,扩大其潜在应用.


