用LC-MS/MS量化人类DNA中的脱氧西瓜诺辛的量化,这是提奥普林治疗优化的标志物
Björn Carlsson1, Louise Karlsson2, Andreas Ärlemalm2,3
1Department of Clinical Pharmacology and Department of Biomedical and Clinical Sciences, Linköping University, Linköping, Sweden. bjorn.carlsson@regionostergotland.se.
这项研究开发了一种新方法来测量DNA中结合的硫氨酸,提供了一种更精确的方法来监测治疗白血病和IBD的药物有效性. 这种基于DNA的测量为蒂奥普林药物作用和治疗药物监测提供了更深入的见解.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 提奥普林 (阿扎西奥普林,6 - 默卡普普林,6 - 提奥瓜宁) 是治疗急性儿童白血病 (ALL) 和炎症性肠病 (IBD) 的关键抗代谢物和免疫调节剂.
- 目前的治疗药物监测 (TDM) 依赖于测量硬样品水解后代谢物的总和,这可能不准确地反映药理活性.
- 氨酸是需要细胞内转化为活性代谢物的前药物,然后这些代谢物被纳入RNA或DNA.
研究的目的:
- 开发一种敏感的分析方法,用于量化直接纳入DNA的硫氨酸代谢物,特别是2'-deoxythioguanosine (dTG).
- 在从全血中提取的DNA中测量dTG与2'-deoxycytidine (dC) 一起.
- 建立一种改善治疗药物监测 (TDM) 的方法,用于提奥普林治疗.
主要方法:
- 从全血中提取DNA,然后进行DNA水解.
- 使用液体染色学与双重质谱学 (LC-MS/MS) 结合使用2'-deoxythioguanosine (dTG) 和2'-deoxycytidine (dC) 的量化.
- 在Xevo TQ-XS系统上使用HSS T3列在积极模式下进行分析,运行时间为5分钟.
主要成果:
- 建立了一种敏感的方法,dTG的度范围为0.04-5nmol/L,dC的度范围为0.1-12.5μmol/L.
- 检测的下限为dTG的0.003nmol/L和dC的0.019μmol/L.
- 观察到高精度,测试内部和测试间的不精确度分别为3.0%至5.1%和8.4%至10.9%;样本稳定性被证实长达4年.
结论:
- 一种新的,灵敏的,快速的LC-MS/MS方法已经成功开发出来,可以量化作为dTG在DNA中融入的氨酸.
- 这种基于DNA的测量提供了与现有的代谢物监测相比,更直接地评估氨酸的药物纳入.
- 开发的方法对未来的临床研究具有显著的潜力,以提高对硫氨酸药理学的理解,并优化TDM策略.
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