尺寸光度测量和光成像对固定沉浸的细胞外囊泡进行了固定
Andreas Wallucks1,2, Philippe DeCorwin-Martin1,2, Molly L Shen1,2
1Biomedical Engineering Department, McGill University, Montreal, QC, Canada.
Journal of extracellular vesicles
|October 14, 2024
概括
我们开发了无标签的EV大小光度 (SP) 来测量细胞外囊泡 (EV) 的大小和数量,没有光斑. 这种方法与光成像无集成,为EV分析提供高吞吐量和灵敏度.
科学领域:
- 生物物理学的生物物理.
- 显微镜的使用方法
- 纳米技术纳米技术
背景情况:
- 细胞外囊泡 (EV) 分析通常依赖于光染色,使EV数量和大小的测量变得复杂.
- 目前的方法需要广泛的样本操纵,限制高通量分析.
研究的目的:
- 引入一种高度敏感的,无标签的方法,用于细胞外囊泡 (EV) 尺寸光度测量 (SP).
- 允许SP与常见显微镜上的光成像 (SPFI) 无集成.
- 建立一个高吞吐量的工作流程,用于EV的特征.
主要方法:
- 使用干扰度散射 (iSCAT) 成像用于无标签的EV尺寸光度.
- 在LED照明的标准倒置光显微镜上实现SP.
- 开发用于自动图像处理的工作流程,包括对齐,偏差校正和点检测.
主要成果:
- 实现一个没有标签的EV尺寸范围从直径37到220nm.
- 与纳米颗粒大小测量的流细胞计相比,显示出更高的灵敏度.
- 成功区分EV染料,观察EV变形,并识别子群.
结论:
- SPFI提供了一种强大的,无标签的方法,用于高通量细胞外囊泡 (EV) 分析.
- 该方法增强了现有的光显微镜技术,用于详细的EV特征.
- SPFI有可能揭示对电动汽车异质性和功能的新见解.
