使用记者基因测试来选和识别调节雌激素受体活动的化学化合物
Masato Ooka1, Srilatha Sakamuru1, J David Furlow2
1National Center for Advancing Translational Sciences, National Institutes of Health, Rockville, Maryland.
Current protocols
|October 15, 2024
概括
开发了高通量选方法,以快速测试调节雌激素受体α (ERα) 的化合物. 这些测试可以有效地识别和确认ERα调节剂用于制药应用.
科学领域:
- 内分泌学 在内分泌学.
- 分子生物学分子生物学
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 雌激素受体α (ERα) 对于繁殖和恒温至关重要,其破坏与癌症等疾病有关.
- 识别ERα调节器对于制药开发和理解内分泌干扰至关重要.
- 高通量选 (HTS) 对于快速测试大型复合库至关重要.
研究的目的:
- 建立和描述可靠的HTS方法来识别ERα调节器.
- 详细说明使用记者基因系统进行基于细胞的测试的协议.
- 为了使成千上万种化合物的有效选.
主要方法:
- 使用了两个不同的细胞系:MCF7-VM7Luc4E2 (发光读取) 和HEK293-ERα-bla (光读取).
- 开发了用于384井和1536井格式的细胞涂层,处理和数据分析的协议.
- 实施了双层方法:初步选,然后进行直角确认.
主要成果:
- 成功建立了用于ERα调节器识别的HTS测定.
- 展示了基于发光和光的报道系统的实用性.
- 验证了识别和确认ERα激活剂和抑制剂的方法.
结论:
- 描述的HTS方法为发现ERα调节器提供了一个有效的平台.
- 这些测试是药物发现和研究ERα功能的宝贵工具.
- 这些协议有助于快速评估潜在的内分泌干扰或治疗用途的化合物.
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