在实验室中选择使用临床样本的人类脑脊髓液特异性吸收体

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分子诊断学 分子诊断学
• 生物标志物发现发现

背景情况:

• 脑脊液 (CSF) 泄漏是一种严重的疾病,具有显著的发病率.
• 美国目前的诊断方法涉及蛋白质电泳,缺乏点的护理 (POC) 解决方案.
• 需要快速,可访问的CSF泄漏检测.

研究的目的:

• 发现选择性地与CSF生物标记物结合的单链脱氧核糖核酸 (ssDNA) 体.
• 为了为基于aptamer的POC CSF检测装置奠定基础.

主要方法:

• 通过指数式丰富 (SELEX) 系统进化联体被采用随机DNA库.
• 量化聚合酶连锁反应 (qPCR) 和光异性质 (FA) 用于评估阿巴胺结合.
• 对于选定的阿普坦酶候选物,评估了结合亲和力和动力学.

主要成果:

• 在14个SELEX循环后,确定了两个主导的ssDNA体 (C2和C3).
• 与血清相比,Aptamers C2和C3对CSF表现出明显更高的亲和力 (分别为~586x和~82x).
• 对C2和C3的分离常数 (K1/2) 确定分别为5.0%和14.1%,表明强结合.

结论:

• 在体外选择成功地确定了两个对CSF生物标记物的高选择性ssDNA体.
• 这些体具有集成到一个快速的,即时的电化学诊断系统的潜力.
• 开发的aptamers代表了CSF泄漏诊断的有希望的进步.