一种改进的高分辨率方法,通过强离子交换HPLC进行空和填充的AAV8体的定量分离

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分析化学 分析化学
• 基因治疗 基因治疗

背景情况:

• 细胞和基因疗法 (CGT) 利用工程细胞和病毒载体来治疗疾病.
• 腺相关病毒 (AAV) 和晶状病毒 (LV) 是常见的CGT病毒载体.
• 非功能性的 (空的或非传染性的) 病毒载体是影响药物的质量和疗效的杂质.

研究的目的:

• 开发一种高分辨率的离子交换色谱 (IEX) 方法,用于分离空的和满的AAV囊.
• 确保该方法支持国际协调会议 (ICH) 临床制造指南.
• 为评估AAV药物产品中的非功能性病毒颗粒提供可靠的分析工具.

主要方法:

• 采用离子交换色谱 (IEX) 用AAV8填充和空囊作为参考标准.
• 优化方法用于高分辨率分离空和完整的病毒囊.
• 在广泛的病毒颗粒度范围内验证了线性和性能.

主要成果:

• 实现了空和满AAV体的高分辨率分离,分辨率为15.
• 在从10^9到10^13 vp/mL的病毒颗粒度中,证明的线性大于0.98.
• 方法提供中等通量容量和减少样品处理时间,以提高效率和节省成本.

结论:

• 开发的IEX方法是一个可靠和可重复的平台,用于精确评估AAV8样本中的非功能性病毒颗粒.
• 这种分析工具通过准确量化体含量来提高CGT产品的质量控制.
• 该方法支持ICH指导方针,并提高了复合AAV (rAAV) 分析的整体质量.